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[產(chǎn)品名稱(chēng)] 通用名稱(chēng):細胞色素P450 3A4基因分型檢測試劑盤(pán)(熒光PCR法)
[包裝規格] 48測試盒
[預期用途] 本試劑盒用于分型定性檢測細胞色素P450 3A4基因亞型,包括CYP3A4*1亞型和CYP3A4* 18B亞型. 細胞色素P450 ( cyochone P450, CYP)是人體內重要的藥物代謝酶,CYP3A 是CYP超家族中的一種酶,在肝臟和腸道中高度表達,CYP3A4和CYP3A5是該酶的重要亞型。目前研究發(fā)現CYP3A4與CYP3AS共同參與免疫抻制劑環(huán)孢素(cydlesporine A, CsA)及他克莫司(axcolimus, FK506) 的代謝,它們的活性高低與CsA和FK506的血藥濃度相關(guān)。CYP3A4 基因位于人類(lèi)第7號染色體q211-22.1,基因全長(cháng)272kb,包括13個(gè)外顯子,編碼502個(gè)氨基酸。個(gè)體間CYP3A4活性的差異8%是由遺傳因素決定,CYP3A4 有超過(guò)40 個(gè)等位基因已經(jīng)確定,不同種族間CYP3A4單核苷酸多態(tài)性(single mucloide polymophism, SNP)位點(diǎn)的發(fā)生頻率不同。
[檢驗原理] 本試劑采用實(shí)時(shí)熒光PCR結合Toqman探針技術(shù)對CYP3A4基因進(jìn)行定性分型檢測。根據GENBANK數據中公布的CYP3A4基因序列,利用擴增阻礙突變系統Amptficaion rfinatony muation syskem, ARMS)分析法設計了特異性引物,特異性探針以FAM標記,每一次檢測進(jìn)行2管反應,即可檢測出CYP3A4亞型.同時(shí)管內添加一對內標引物和探針,以HEX標記,可監控儀器故障、試劑因素.聚合酶活性或樣本中的抑制物等因素造成的假陰性結果。探針為包括3’端報告基團和3'端淬滅基團的寡核苷酸,在PCR擴增過(guò)程中,當探針完整時(shí),由于淬滅基團靠近報告基團,報告基團發(fā)出的熒光被淬滅基團吸收,不發(fā)出熒光信號.引物延伸時(shí),與模板結合的探針被Taq酶(5°→3°外切核酸酶活性)切斷,報告基團與淬滅基團分離,產(chǎn)生熒光信號,熒光定量PCR儀根據檢測到的熒光信號自動(dòng)繪制出時(shí)護增曲線(xiàn)。從而實(shí)現對CYP3A4基因的定性分型檢測.